Frotiul de sânge: un algoritm de testare

Frotiurile de sânge sunt o metodă foarte frecventă, permițând diagnosticarea rapidă a multor anomalii comune. Condițiile de bază pentru utilizarea eficientă a acestei metode de diagnosticare sunt respectarea strictă a tehnicii de pregătire a frotiului și examinarea sistematică în conformitate cu algoritmul.

În practică, nu este întotdeauna posibil să se obțină date obiective cu un test hematologic de diagnostic rapid. Examinarea frotiului de sânge permite clarificarea și completarea relativ rapidă a informațiilor obținute. Această tehnică face posibilă detectarea unor elemente care nu sunt evidente în examinările clinice automate, cum ar fi o modificare a numărului de eritrocite împreună cu o deplasare a numărului de leucocite spre stânga, adică spre neutrofile imature, sau prezența paraziților. În unele situații, această tehnică permite un diagnostic definitiv.

Algoritm de investigare

Acesta este următorul:

• Imediat după recoltarea probei, sângele trebuie plasat rapid într-un tub care conține un anticoagulant pentru a menține calitatea celulelor.
• Colorația cu albastru de metilen permite identificarea reticulocitelor.
• Evaluarea se face pe un strat subțire de frotiu cu o citire la nivelul cozii la microscop.
• O examinare sistematică a frotiului de sânge se referă la algoritmul APEL.

Pentru ce se utilizează acest test?

În acest scop:

• Ca parte a determinării anomalii de formă și dimensiune, precum și modificări ale numărului de eritrocite, trombocite, leucocite și diferite tipuri de elemente sanguine (inclusiv orice formă imatură), împreună cu procentele acestora.
• Pentru diagnosticarea diferitelor boli legate de tulburări de formare, de funcționare sau de distrugere excesivă a elementului de formă.
• Pentru a monitoriza formarea de celule cu gradul lor de maturitate în leucemie, după radioterapie, precum și în cadrul tulburărilor de formare a hemoglobinei.

Când este oportună această examinare??

În cazul în care testul general și numărul de celule albe din sânge (care este cea mai frecventă indicație) arată o creștere semnificativă a celulelor albe din sânge sau a celulelor atipice sau imature, atunci trebuie efectuat un frotiu de sânge. Printre altele, această examinare este importantă într-o serie de astfel de situații:

• Pe fondul unei suspiciuni de boală care afectează celulele.
• Atunci când se utilizează medicamente care pot afecta producția lor.

În cadrul unui test de frotiu sanguin, medicii folosesc în general fluide biologice venoase sau capilare.

Pregătire

Atunci când biomaterialul este colectat cu o dilatare a venei de diametru mediu, sângele trebuie introdus rapid într-un tub care conține un anticoagulant. Adesea se utilizează etilendiaminotetraacetat, deoarece permite o mai bună conservare a particulei de test. Cu toate acestea, pentru a preveni diferite tipuri de degradare morfologică a celulelor, intervalul de timp dintre colectarea biomaterialului proaspăt și bine omogenizat și realizarea lamei trebuie să fie cât mai scurt posibil.

Pregătirea frotiului începe cu prelevarea unei picături de sânge (de obicei doar una dintr-un tub capilar) pe marginea unei lame de microscop. Apoi se unge cu ajutorul unei a doua bucăți de sticlă care alunecă peste prima. Un frotiu bine preparat are așa-numita "limbă de pisică" la capăt, ceea ce indică faptul că specimenul a fost pregătit corect și oferă o bună calitate a examinării.

Colorare

Colorația se face prin metoda standard. Înainte de această procedură, un frotiu de sânge prelevat se usucă la aer prin zdruncinarea lamei, ceea ce evită formarea unei pete albe necolorate în centrul celulelor roșii. Prin urmare, acest lucru exclude interpretarea eronată a hipocromiei.

Pot exista și alte artefacte de colorare. De exemplu, colorația Wright furnizează precipitat. Acest lucru se întâmplă dacă colorantul nu este reîmprospătat după o anumită perioadă de timp, dacă lamelele au fost lăsate în soluția de colorare pentru o perioadă lungă de timp sau dacă au fost spălate prost. Acumularea de colorant rezultată poate fi interpretată ca prezența paraziților și a bacteriilor. În plus, colorarea frotiurilor cu morfologie celulară poate fi alterată prin contactul lamei cu vapori de formol. Probele se colorează de obicei prin metoda Romanowsky, bazată pe albastru de metilen și eozină.

Colorația clasică a frotiului de sânge este de obicei semnificativ diferită de colorația rapidă. În ultimii ani, aceste tehnici au avut avantajul de a fi tolerante la variațiile de aciditate ale soluțiilor și la formarea de substanțe de depozit. Cu toate acestea, ele sunt mai puțin eficiente pentru detectarea policromatofilelor și nu modifică bine culoarea granulelor bazofilelor și mastocitelor.

Este necesară o nouă colorare cu albastru de metilen pentru a obține o imagine vizuală specifică a reticulocitelor. În tuburi de plastic, picătura de sânge este amestecată cu două elemente NBM. Se lasă tubul la temperatura camerei timp de zece minute. O picătură mică este plasată pe lamă după agitare și se întinde în același mod ca la efectuarea unui frotiu. Apoi, lamelele se usucă rapid la aer și se examinează la microscop cu o mărire mare.

Examinare sistematică

Ca parte a evaluării, este esențial să se respecte un model de examinare uniform. Microscopia unui frotiu de sânge, care se realizează într-un singur strat subțire, cu o rotunjime la vârf, care se îngroașă spre baza sa. Celulele sunt evaluate pe un grafic subțire, deoarece graficul gros oferă puține informații. La mărire mică, partea marginală a frotiului, mai ales capătul rotunjit, este de obicei examinată pentru agregate plachetare sau celule late atipice (limfoblaste sau celule dendritice).

Stratul poate avea o formă de zig-zag sau de coadă de porc, ceea ce permite ca diferitele celule sanguine să fie observate destul de clar într-o examinare dirijată cu ajutorul algoritmului APEL, unde A sugerează alte elemente atipice cu paraziți, P indică trombocite, E indică eritrocite și L indică leucocite.

Frotiurile de sânge sunt o tehnică obișnuită, care permite diagnosticarea rapidă a unei varietăți de anomalii comune. Principalele condiții prealabile sunt utilizarea eficientă Metoda se bazează pe respectarea strictă a unei tehnici de examinare a frotiului cu analiză sistematică în conformitate cu algoritmul procedurii.

Ce înseamnă rezultatele?

O modificare a unui frotiu de sânge nu dă întotdeauna un diagnostic. Acest lucru indică, de obicei, prezența unei boli specifice, care necesită examinări ulterioare pentru a stabili un diagnostic precis.

Caracterul rezonabil al testului

Există o gamă largă de boli și afecțiuni care pot modifica proprietățile celulelor care circulă în fluxul sanguin. În mod normal, numai elementele mature din măduva osoasă intră în acest biomaterial, dar în unele patologii, cum ar fi leucemia, pot intra omologii imaturi sub formă de blastocite. În cazul unor boli, de exemplu, infecții masive, globulele albe pot prezenta impurități caracteristice - celulele însele devin atipice, ca în mononucleoza infecțioasă.

În cazul deficienței de fier sau de vitamina B₁₂, În cazul tulburărilor congenitale de sinteză a hemoglobinei, proprietățile și aspectul globulelor roșii se pot modifica. Dacă aceste celule anormale sunt găsite în număr excesiv într-un frotiu, pacientul poate fi suspectat de a fi cauza anomaliei și se poate obține o a doua opinie. Frotiurile de sânge pot fi administrate de rutină persoanelor cu cancer de măduvă osoasă sau ganglionilor limfatici, ca parte a monitorizării și controlului eficacității terapiei.